 |
|
Тема: Катодная вольтамперометрия
В основе данного метода лежит процесс электровосстановления кислорода ЭВО2, модельная реакция протекает по механизму аналогичному восстановлению кислорода в клетках и тканях
| О2 + е →О2- Н+ + О2- → НО2˙ НО2˙+Н+ + е → Н2О2 Н2О2˙+2Н+ + 2е → 2Н2О | (1) (2) (3) (4) |
Метод рассматривает реакции 1-3. предполагается, что антиоксиданты (АО), имеющие восстановительную природу, реагируют с кислородом и его активными радикалами на поверхности индикаторного электрода, что вызывает уменьшение тока ЭВ О2 на ртутно-пленочном электроде:
Методика эксперимента заключается в съемке вольтамперограмм катодного восстановления О2 с помощью анализатора АОА «Антиоксидант», подключенного к ПК (программа «Электрод»).
Электрохимическая ячейка представляет собой стеклянный стаканчик с раствором фонового электролита (V=10 мл) и опущенными в него индикаторным ртутно-пленочным; хлорид-серебрянными (рабочим и вспомогательным) электродам.
Фоновый электролит: для водорастворимых образцов фосфатный буфер (рН = 6,86), для спиртовых – 0,1М спиртовой NaClO4.
Приготовление фосфатного буфера: (методика ГОСТа 8.135–74) готовый стандарт- титр (0,025 М КН2РО4 и 0,025 М Na2НРО4) переносится в мерную колбу (V= 1 л) и растворяется в дистиллированной воде.
Приготовление 0,1М NaClO4: кристаллический NaClO4 (ОСЧ) растворяется в этаноле. Важно: для образцов с разным содержанием этанола берется в качестве фонового идентичный по содержанию спирта раствор NaClO4.
Отбор проб: берется аликвота раствора, исследуемого на антиоксидантную активность, объемом 0,1, 0,5 или 1 мл. Проводится 3 параллельных определения, рассчитывается средний коэффициент антиоксидантной активности КАОА.
, [мкмоль/л × мин]
где СО2 – концентрация кислорода в исходном растворе без АО, мкмоль/л;
t – время протекания реакции;
Ii – текущее значение предельного тока, ЭВО2, мкА;
I – начальное значение предельного тока, ЭВО2 в отсутствии анализируемого образца, мкА.
Ход работы на приборе:
1) Включить прибор в сеть;
2) Запустить программу «Электрод», в главном меню выбрать пункт «Изсмерение», в закладке «Фоновый электролит» установить параметры для процесса регистрации тока – электровосстановление О2 фонового раствора (см. табл. 1).
| Интенсивность перемешивания | от 1до 9 |
| Время активации | 1 с |
| Время перемешивания | 10 с |
| Время успокоения | 20 с |
| Время измерения | 50 с |
| Число повторов |
3) Нажать кнопку «Старт», начинается процесс регистрации, повторяющийся заданное количество раз. Прибор фиксирует волну электровосстановления кислорода, автоматически усредняет полученные вольтамперограммы, находит максимум тока электровосстановления.
4) По окончании процесса в ячейку с фоновым электролитом ввести исследуемый раствор, перейти на закладку «Фоновый электролит с добавление исследуемого раствора», установить параметры для процесса регистрации тока (см. табл. 2).
| Интенсивность перемешивания | от 1до 9 |
| Время активации | 180 с |
| Время перемешивания | 10 с |
| Время успокоения | 20 с |
| Время измерения | 50 с |
| Число повторов |
5) Нажать кнопку «Старт», начинается процесс регистрации, повторяющийся заданное количество раз. Получение результатов происходит после нажатия кнопки «Рассчитать», предварительно для кинетического критерия необходимо выбрать значение концентрации О2 для нужного фонового электролита, в котором проводились исследования.
6) При нажатии кнопки «Сформировать отчет» откроется печатная форма документа, которую можно сохранить в формате Microsoft Word.