 |
|
Використовуючи електронно мікроскопічні, біохімічні та імунологічні методи дослідження вірусів і вірусних компонентів, порівняйте спецпифічність цих груп методів
При дослідженні вірусів та їх компонентів використовують методи молекулярної біології, які дають змогу встановити спосіб проникнення вірусів в клітину, структуру вірусних часток, нуклеїнових кислот, ліпідів.
Вивчення структур вірусів ускладнено через малих розмірів і слабкоюрозсіює здатності віріона. Відтінення металамидосліджуваного об'єкта при поєднанні з кріогенними методиками (заморожування -висушування) дозволяє отримати важливу інформацію при вивченні структури віріона ізометричних вірусів. Широке поширення набула методика негативного контрастування вірусів за допомогою вольфрамофосфорної кислоти, при дії їдкого калію або їдкого натрію змінюється і після нанесення препарату на вірус створює зону високого розсіювання електронів, у результаті чого виявляються морфологічні ознаки вірусу. Загальна інформація про морфогенез вірусів отримана за допомогою ультратонких зрізів вірусів. Техніка отримання ультратонких зрізів вірусів не відрізняєтьсявід загальноприйнятої. В останні роки зростає питома вага ЕМ як експрес-методу або діагностики вірусних інфекцій.
Особливо велика роль методу імунної мікроскопії, що дозволяє встановити родову приналежність вірусу.
ПЛР-діагностика виявляє наявність збудників інфекційних захворювань в тих випадках, коли іншими методами (імунологічними, бактеріологічними, мікроскопічними) це зробити неможливо. ,Імунологічні методи: базуються на антигенних властивостях Для кількісного визначення таких молекул, присутніх в надзвичайно низьких концентраціях, застосовують радіоіммуноаналіз і ферментний іммуносорбентний аналіз. Иммунодиффузии в електричному полі можна виробляти з одночасним зустрічним рухом антигенів і антитіл; цей спосіб названий зустрічним електрофорезом. Реакції гемаглютинації та зв'язування комплементу Якщо антитіла присутні в таких низьких концентраціях, що їх не вдається виявити і кількісно визначити за допомогою зустрічного і ракетного електрофорезу, застосовують реакцію гемаглютинації. Вона заснована на здатності антитіл перехресно зв'язуватися з еритроцитами, взаємодіючи з їх поверхневими антигенами. Реакція антиген-антитіло веде до утворення імунних комплексів, які пов'язують комплемент при його активації класичним шляхом, і на цьому заснований один з кількісних методів визначення антигенів і антитіл. За допомогою реакцій гемаглютинації та зв'язування комплементу вдається виявляти антитіла, присутні в концентрації <1 мкг / мл.
Імунологічний аналіз антигенів і антитіл за допомогою мічених реагентів
Методи цієї категорії відрізняються дуже високою чутливістю і економічністю у витрачанні реагентів. Найбільш поширений з усіх імунологічних методів - це, ймовірно, іммуносорбентний аналіз антитіл із застосуванням лігандів, мічених радіоізотопами чи ферментами; він дозволяє досліджувати велику кількість зразків у відносно короткий час. Кількість антигену можна вимірювати за допомогою методу «подвійний антигенної пастки» або конкурентного іммуноаналі через із застосуванням будь-якого маркера для визначення
За інформацією про стандарти бактеріологічної чистоти харчових продуктів розробити поетапну схему для виділення та ідентифікації певних груп і видів мікроорганізмів з кондитерських виробів
Під час зберігання багато видів кондитерських виробів зазнають мікробіологічного псування. Особливо поширеним є пліснявіння. Плісняві гриби невибагливі до джерел харчування і можуть розвиватись у несприятливих умовах. В процесі життєдіяльності вони споживають речовини продукту і виділяють сполуки власного обміну, з неприємним запахом, частина з яких отруйна. Розвиваються мікроорганізми особливо швидко в кремах. Мікрофлора крему представлена переважно гнилісними, молочнокислими і пліснявими мікроорганізмами. У крем потрапляє значна кількість мікроорганізмів з маслом, у тому числі бактерії кишкової палички. Найбільш небезпечними є бактерії золотистого стафілококу. Під час життєдіяльності стафілокок продукує ентеротоксин, який може стати причиною харчового отруєння. Повна затримка розмноження стафілококу відбувається за концентрації цукру понад 60 %, а тому вироби з масляним кремом, що містять понад 70 % цукру, більш стійкі до розвитку в них мікроорганізмів.
Виділенню чистих культур з природних джерел найчастіше передує одержання нагромадувальної культури, в якій переважають мікроорганізми однієї фізіологічної групи. Для цього необхідно створити відповідні елективні умови: сприятливі для росту культури, яку виділяють, і несприятливі для всіх інших мікроорганізмів.
Ӏ етап кондитерський виріб вивчають за зовнішнім виглядом, консистенцією, кольором, запахом. Посів матеріалу на тверде, рідше, рідке поживне середовище.
ӀӀ етап на поверхні щільного живильного середовища мікроорганізми утворюють суцільний ріст, або ізольовані колонії. Характеристика колоній: розміри, колір,характер країв і поверхні агару. На рідких живильних середовищах бактерії здатні викликати помутніння, інколи на дні пробірки утворюється осад.
ӀӀӀ етап вивчення характеру росту чистої культури мікроорганізмів та їх ідентифікація. Фарування за грамом. Якщо бактерії одно типові – роблять висновок про чистоту культури.
ӀV етап культуральна ітентифікація
V етап вивчення біохімічних властивостей бактерій.
Дослідження здатності розщеплювати білки, вуглеводи, цукри, пептони, ріст на лактозі (середовище Ендо, Левіна), ліполітична властивість.
VӀ етап встановлення видової приналежності
VӀӀ етап визначення чутливості до антибіотиків
На підставі морфологічних, культуральних, біохімічних та інших властивостей можна зробити остаточний висновок про ідентифікацію.