Задача 5. При проведении профилактического осмотра медицинского персонала стоматологической клиники проводили тест на выявление носителей гепатита В.

ЗАНЯТИЕ №2

Задания, выполняемые в ходе занятия:

Задание 1. Из эпидемиологически опасного района поступили пробы тканей крупного рогатого скота для профилактической обработки с целью выявления возбудителя сибирской язвы.Для проведения исследований выбрана Реакция кольцепреципитации по Асколи.

Асколи (A. Ascoli, 1877-1957, итал. биохимик) предложил использовать реакцию термоиммунопреципитации, для выявления сибиреязвенного термостабильного АГ в трупах павших животных, некротической ткани карбункулов, кожевенном сырье и готовой продукции. Для получения экстракта патологический материал измельчают, заливают 25 - 50-кратным объемом физ. раствора, кипятят 5-10 мин, фильтруют. В полученном фильтрате определяют наличие АГ.

Компоненты реакции:

1. Нормальная сыворотка (отрицательный контроль)

2. Преципитирующяая сыворотка (положительный контроль)

3. Изотонический раствор NaCI

4. Исследуемый материал (сыворотка крови)

Принцип реакции:

Образец Образец Контроль Контроль №1 №2 + - культуры сыворотки

Сделайте вывод: ____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Задание 2. В лабораторию поступил материал – отделяемое с миндалин, от детей с подозрением на дифтерию. У всех пациентов наблюдали повышение температуры (38, 39 °С), головную боль, отсутствие аппетита, боль в горле, особенно при глотании. Небные миндалины увеличены, у некоторых детей на миндалинах обнаружены пленки грязно-серого, желто-серого или кремового цвета.

Для проведения исследований выбрана Реакция преципитации в геле: в чашку Петри на прозрачную питательную среду помещают полоску стерильной фильтровальной бумаги, пропитанной антитоксической противодифтерийной сывороткой. Исследуемые культуры засевают в виде бляшек по обе стороны от полоски фильтровальной бумаги. В качестве контроля используют токсигенную и нетоксигенную культуру.

Зарисуйте результаты реакции.

Задание 3. В лабораторию на исследование поступила сыворотка от пациентов с диагнозом сифилис. У пациентов обнаружены уплотнения кожи локализованные в области половых органов, уплотнения безболезненны и имеет четкие границы, признаки воспаления отсутствуют (твердый шанкр). Регионарные лимфоузлы увеличены, безболезненные.

Для проведения исследований выбрана Реакция связывания комплимента:

Для ее проведения необходимы 5 ингредиентов, а именно: АГ, AT и комплемент (первая система), эритроциты барана и гемолитическая сыворотка (вторая система). В качестве комплемента используют свежую или сухую сыворотку морской свинки.

Механизм. РСК проводят в две фазы: 1-я фаза — инкубация смеси, содержащей три компонента антиген + антитело + комплемент; 2-я фаза (индикаторная) — выявление в смеси свободного комплемента путем добавления к ней гемолитической системы, состоящей из эритроцитов барана, и гемолитической сыворотки, содержащей антитела к ним. В 1-й фазе реакции при образовании комплекса антиген—антитело происходит связывание им комплемента, и тогда во 2-й фазе гемолиз сенсибилизированных антителами эритроцитов не произойдет; реакция положительная. Если антиген и антитело не соответствуют друг другу (в исследуемом образце нет антигена или антитела), комплемент остается свободным и во 2-й фазе присоединится к комплексу эритроцит — антиэритроцитарное антитело, вызывая гемолиз; реакция отрицательная.

Схема РСК с сывороткой здорового Схема РСК с сывороткой больного

Критерий оценки: задержка гемолиза говорит о соответствии антигена диагностикума специфическим антителам сыворотки обследуемого.

Критерий учета: задержка гемолиза.

Критерий достоверности:

- гемолиз в К-, КАГ, КГС;

- задержка гемолиза в К+, КК, КЭ.

сыворотка от обследуемых №1, №2 с диагнозом сифилис, с типоспецифическим антигеном

К+ К- №1 №2 KAГ КК KГС КЭ

Зарисуйте результаты реакции.

Задание 4. Задача. При проведении профилактического осмотра медицинского персонала стоматологической клиники проводили тест на выявление носителей ВИЧ.

Для проведения исследований выбран иммуноферментный анализ (ИФА).

Компоненты реакции: 1. Исследуемая сыворотка

2. Иммобилизированный в лунке АГ

3. Фермент

4. Субстрат

Критерий учета: появление желтой окраски, которая свидетельствует о распаде субстрата в присутствии, пероксидазы.

Критерий достоверности: К - - реакция с сывороткой, заведомо не содержащей антигены к ВИЧ, К+ реакция с сывороткой, содержащей этот антиген.

К+ К- №1 №2 №3

Зарисуйте результаты реакции.

Задача 5. При проведении профилактического осмотра медицинского персонала стоматологической клиники проводили тест на выявление носителей гепатита В.

Для проведения исследований выбран иммуноферментный анализ (ИФА).

К+ К- №1 №2 №3

Зарисуйте результаты реакции.