Здавалка
Главная | Обратная связь

Дисциплина «Медицинская и ветеринарная биотехнология»



 

3. Интерфероны. Биохимические свойства, механизм действия. Биотехнологические методы получения интерферонов (на основе культивирования клеток крови и фибробластов). Получение интерференов на основе рекомбинантных ДНК

Интерферон относится к важным защитным белкам иммунной системы. Открыт при изучении интерференции вирусов, т. е. явления, когда животные или культуры клеток, инфициро­ванные одним вирусом, становились нечувс­твительными к заражению другим вирусом. Оказалось, что интерференция обусловлена образующимся при этом белком, обладаю­щим защитным противовирусным свойством. Этот белок назвали интерфероном.Интерферон представляет собой семейство белков-гликопротеидов, которые синтезируются клетками иммунной системы и соединитель­ной ткани. В зависимости от того, какими клетками синтезируется интерферон, выделя­ют три типа: α, β и γ-интерфероны. Альфа-интерферон вырабатывается лейкоцитами, и он получил название лейкоцитар­ного; бета-интерферон называют фибробластным, поскольку он синтезируется фибробластами — клетками соединительной ткани, а гамма-интерферон — иммунным, так как он вырабатывается активированными Т-лимфоцитами, макрофагами, естественными киллерами, т. е. иммунными клетками. Интерферон синтезируется в организме постоянно, и его концентрация в крови де­ржится на уровне примерно 2 МЕ/мл (1 меж­дународная единица — ME — это количество интерферона, защищающее культуру клеток от 1 ЦПД50 вируса). Выработка интерферона резко возрастает при инфицировании виру­сами, а также при воздействии индукторов интерферона, например РНК, ДНК, сложных полимеров. Такие индукторы интерферона получили название интерфероногенов. Помимо противовирусного действия интер­ферон обладает противоопухолевой защитой, так как задерживает пролиферацию (размноже­ние) опухолевых клеток, а также иммуномодулирующей активностью, стимулируя фагоцитоз, естественные киллеры, регулируя антителообразование В-клетками, активируя экспрессию главного комплекса гистосовместимости. Механизм действия интерферона сложен. Интерферон непосредственно на вирус вне клетки не действует, а связывается со спе­циальными рецепторами клеток и оказыва­ет влияние на процесс репродукции вируса внутри клетки на стадии синтеза белков. Применение интерферона. Действие интерферона тем эффективнее, чем раньше он начинает синтезироваться или пос­тупать в организм извне. Поэтому его использу­ют с профилактической целью при многих ви­русных инфекциях, например гриппе, а также с лечебной целью при хронических вирусных инфекциях, таких как парентеральные гепати­ты (В, С, D), герпес, рассеянный склероз и др. Интерферон дает положительные результаты при лечении злокачественных опухолей и забо­леваний, связанных с иммунодефицитами. Интерфероны обладают видоспецифичностью, т. е. интерферон человека менее эффек­тивен для животных и наоборот. Однако эта видоспецифичность относительна. Получение интерферона. Получают интерферон двумя способами: а) путем инфи­цирования лейкоцитов или лимфоцитов кро­ви человека безопасным вирусом, в результате чего инфицированные клетки синтезируют интерферон, который затем выделяют и конс­труируют из него препараты интерферона; б) генно-инженерным способом — путем выра­щивания в производственных условиях рекомбинантных штаммов бактерий, способных продуцировать интерферон. Обычно используют рекомбинантные штаммы псевдомонад, кишечной палочки со встроенными в их ДНК генами интерферона. Интерферон, получен­ный генно-инженерным способом, носит на­звание рекомбинантного. Рекомбинантный интерферон нашел ши­рокое применение в медицине как профилак­тическое и лечебное средство при вирусных инфекциях, новообразованиях и при иммунодефицитах.

 

 

.

10. Молекулярная диагностика, молекулярное лечение. ДНК-диагностика. ДНК-лечение.

 

Молекулярная диагностика – это диагностика на генном уровне. Если современная медицина пытается установить, «чем болеете», то генная – «чем будете болеть». Это открывает широчайшие перспективы, в первую очередь профилактики заболеваний. А это всегда легче, чем лечить. Генная диагностика позволяет обнаружить как наследственные заболевания, так и предрасположенность к отклонениям в будущем. И сделать это возможно ещё в утробе матери после десятинедельного развития плода.В генной терапии лечебным инструментом выступают генные конструкции. С их помощью можно подавлять больные гены, корректировать их, или производить замену. Геном человека насчитывает 35-50 тысяч генов. Расшифрованы гены около 320 частых наследственных болезней и 170 редких. Эти методы достаточно просты и широко применяются в современной медицине. Но пока, к сожалению, диагностируются не более 40 тяжелых наследственных болезней.Некоторые из них, обнаруженные ещё в утробе матери, в действительности могут развиться только при неблагоприятных условиях, что в значительной степени затрудняет родителям принятие верного решения. Молекулярная диагностика даёт показания к заболеванию задолго до появления симптомов. Сейчас абсолютно точно диагностируются рак лёгких, простаты, остеопороз, астма и ряд других. Следует отметить, что в онкологии эта диагностика является особо успешной и занимает 60% от всей. На инфекционные болезни приходится 15% и 25% на все остальные.ДНК-диагностика - это совокупность методов и технологий, которые позволяют выявлять повреждения в определенном гене человека, который либо является причиной различных заболеваний, либо может к ним привести. Для ДНК-диагностики подходят следующие виды биологических материалов: кровь, букальный эпителий, слюна, сперма, ворсины хориона и амниотическая жидкость, образцы различных органов и тканей, содержащих целые клетки с неразрушенными ядрами. Можно использовать пятна крови, нанесенные на пористую поверхность, а также трупный и эксгумированный материал. Однако, чаще всего источником ДНК служат клетки крови и плодный материал. ДНК-диагностику используют в следующих случаях:Медико-генетическая консультация при наследственных заболеваниях. Проводится в случаях наличия в семье ребенка или близкого родственника с наследственным заболеванием. Диагностика проводится с целью избежать рождение больного ребенка.Установление биологического родства. Экспертиза позволяет со 100 %-ной вероятностью исключить отцовство (материнство) или с вероятностью не ниже 99,99 % установить наличие биологического родства. В общем случае срок проведения анализа 2 недели с момента поступления образцов в лабораторию. Такая диагностика возможна только по постановлению следственных и судебных органов или в независимых лабораториях.Диагностика к предрасположенности к некоторым заболеваниям, таким как атеросклероз, ишемическая болезнь сердца, эссенциальная гипертензия, остеопороз, сахарный диабет, бронхиальная астма, рак и пр. Генетическое тестирование не позволяет установить диагноз, а дает возможность выявить наличие тенденции будущих болезней и, исходя из современного врачебного опыта, наметить пути их ранней профилактики. Диагностика некоторых форм бесплодия и невынашивания беременности.Определение ДНК возбудителя при различных бактериальных и вирусных инфекцияхВозбудители практически всех инфекционных болезней вирусы и бактерии также обладают ДНК или РНК, что позволяет проводить их диагностику аналогичными методами. Использование этих методов для определения возбудителей урогенитальных инфекций, многие из которых часто протекают бессимптомно, но приводят к неблагоприятным последствиям, помогло поднять их диагностику на принципиально иной уровень.

 







©2015 arhivinfo.ru Все права принадлежат авторам размещенных материалов.