Главная | Обратная связь

Критерии идентификации клеток крови на мазках периферической крови, окрашенных по методу Романовского-Гимза.

1. Эритроциты.Средний диаметр 7,2 μm. Эритроциты округлые, безъядерные клетки. Они окрашиваются в оттенки розового цвета (эозинофилия) благодаря высокому содержанию гемоглобина. Центральная часть окрашивается светлее, чем периферическая, вследствие дисковидной формы эритроцитов (края толще, чем центр).
2. Нейтрофильные гранулоциты – самые многочисленные лейкоциты (40-75%). Диаметр 10-12 мкм. Зрелые сегментоядерные лейкоциты имеют интенсивно окрашенное (гетерохроматиновое) ядро из 2-5 сегментов, связанных узкими нитевидными перемычками. Цитоплазма на светооптическом уровне слабооксифильна. Специфические (вторичные) нейтрофильные гранулы – очень мелкие (0,1 – 0,3 мкм), окрашиваются слабо (нейтрофильно) и плохо видны под световым микроскопом. Видны, главным образом, азурофильные (первичные, неспецифические, лизосомальные) гранулы, составляющие 10-30% общего числа гранул, они более крупные (0,4-0,8 мкм) и окрашиваются азуром в розово-фиолетовый цвет. В крови встречаются также менее зрелые формы, отличающиеся от зрелых формой ядер: палочкоядерные нейтрофилы (1-6%), их ядро имеет форму изогнутой палочки, подковы или латинской буквы S; и юные нейтрофильные гранулоциты (до 0,5%) с бобовидным ядром.
3. Эозинофильные гранулоциты (эозинофилы)– на мазках крупнее, чем нейтрофилы (диаметр 12-17 мкм); ядро обычно состоит из двух, реже трёх сегментов, светлее, чем ядра нейтрофилов; легко узнаются на мазках благодаря многочисленным эозинофильным гранулам, заполняющим их цитоплазму (около 200 гранул на клетку). Гранулы более крупные (до 1,5 мкм), чем гранулы нейтрофилов, окрашиваются эозином в розово-красный цвет).
4. Базофильные гранулоциты (базофилы) –самая малочисленная группа лейкоцитов и гранулоцитов (0.5-1.0% от общего числа лейкоцитов). Размеры на мазках составляют 9-12 мкм. Ядра базофильных гранулоцитов – дольчатые (содержат 2-3 сегмента) или S-образные, относительно плотные, но более светлые, чем у нейтрофилов и эозинофилов, часто трудно различимы, так как маскируются ярко окрашенными специфическими гранулами. Специфические базофильные гранулы – крупные (диаметр 0.5-2.0 мкм), окрашиваются метахроматически – с изменением оттенка основного красителя вследствие высокого содержания сульфатированных гликозаминогликанов.
5. Лимфоцитызанимают второе место по численности среди лейкоцитов взрослого (20-35%). Они представляют собой группу морфологически сходных, но функционально разнообразных лейкоцитов-агранулоцитов. По размерам выделяют группы малых, средних и больших лимфоцитов.

Малые лимфоциты –диаметр на мазках 6-7 мкм – составляют до 80-90% всех лимфоцитов крови. Ядро малого лимфоцита – круглое, овальное или бобовидное, тёмное (с преобладанием гетерохроматина), занимает до 90% площади клетки. Цитоплазма малых лимфоцитов, окружающая ядро в виде узкого ободка, окрашивается резко базофильно.

Средние лимфоциты (диаметр на мазках – 8-9 мкм) в крови человека составляют около 10% всех лимфоцитов. Ядра светлее, чем ядра малых лимфоцитов, а цитоплазма занимает относительно больший объём в клетках.

Большие лимфоциты – диаметр на мазках – 10-18 мкм, обычно отсутствуют в крови. Характеризуются относительно светлым ядром (с преобладанием эухроматина) ядром округлой или бобовидной формы с отчетливо выявляемыми ядрышками, обширной слабобазофильной цитоплазмой. Они обычно являются активно делящимися (бластными) формами развивающихся клеток лимфоидного ряда. Особая разновидность больших лимфоцитов - большие гранулярные лимфоциты (БГЛ) (5-10% лимфоцитов крови); ядро БГЛ – бобовидное с вдавлениями, умеренно плотное, смещенное к одному краю клетки; цитоплазма светлая, содержит 30-50 крупных азурофильных гранул. БГЛ выполняют функцию NK-клеток (натуральные киллеры).

6. Моноциты–самые крупные из лимфоцитов (размеры на мазках – 18-20 мкм). Ядро крупное, эксцентрично расположенное, чаще бобовидной формы (реже слабо-дольчатое), более светлое, чем у лимфоцитов (гетерохроматин рассеян в виде мелких гранул), иногда видно ядрышко. Цитоплазма слабобазофильная (серовато-голубая), в цитоплазме присутствуют азурофильные гранулы (лизосомы).

Препарат 2. Рыхлая волокнистая (неоформленная) соединительная ткань (РВСТ). Тотальный (пленочный) препарат подкожной рыхлой соединительной ткани. Окраска железным гематоксилином.

Препарат представляет собой плёнку рыхлой волокнистой соединительной ткани, которую растягивают на покровном стекле, фиксируют и окрашивают. При этом получается препарат неодинаковой толщины. На малом увеличении микроскопа следует выбрать наиболее светлый участок препарата, затем рассмотреть его под большим увеличением.

На препарате можно различить все три компонента рыхлой волокнистой соединительной ткани: клетки различных типов, волокна и основное амopфное вещество.

Основное аморфное вещество – гомогенное слабоокрашенное вещество, фон для волокон и клеток.

Волокна:коллагеновые волокна – более толстые, лентовидные, слегка извитые, неветвящиеся; эластические волокна – тонкие, прямые, иногда разветвленные.

Клетки: основные клетки волокнистой соединительной ткани – фибробласты и макрофаги.

Фибробласты- наиболее многочисленный и функционально ведущий тип клеток РВСТ, это удлиненные отростчатые клетки с нерезкими (размытыми) контурами клетки (поскольку эктоплазма фибробластов по восприятию красителя не отличается от основного вещества) и с крупным светлым овальным ядром.

Макрофаги в отличие от фибробластов имеют неровные, но чёткие границы клетки, цитоплазма более тёмная вакуолизированная (вследствие большого количества фаголизосом и вакуолей), ядро – тёмное, плотное, более мелкое иногда бобовидной формы.

На препаратах также могут встретиться и другие клетки: тучные клетки, гранулоциты, лимфоциты, плазматические клетки.

Тучные клетки (тканевые базофилы) – крупные клетки овальной или неправильной формы с округлым ядром, цитоплазма содержит множество округлых, сильно окрашенных гранул, которые маскируют плохо различимое ядро. Чаще всего располагаются по ходу кровеносных сосудов.

Лимфоциты характеризуются очень плотным маленьким ядром и минимальным количеством цитоплазмы.

Нейтрофильные гранулоциты – мелкие клетки, ядро которых может иметь кольцевидную форму (поскольку данный препарат из ткани крысы).

Плазматические клетки – более крупные клетки с эксцентрично расположенным ядром, в которым чередование гетеро- и эухроматина даёт характерную картину «колеса со спицами», цитоплазма тёмная, за исключением светлой зоны около ядра, называемой «дворик», или «макула» (зона комплекса Гольджи и центриолей).

Зарисовать и обозначить:

1) фибробласт; 2) макрофаг; 3) лимфоцит; 4) гранулоцит; 5) тучная клетка;

6) коллагеновое волокно; 7) эластическое волокно; 8) основное (аморфное) вещество.

Препарат 3. Плотная оформленная коллагеновая соединительная ткань. Сухожилие в продольном разрезе. Окраска гематоксилином и эозином.

На малом увеличении видно, что сухожилие состоит из толстых, параллельных друг другу коллагеновых волокон, окрашенных эозином. На большом увеличении видно, что коллагеновые волокна отделены друг от друга одним слоем фиброцитов (синонимы: тендиноциты, сухожильные клетки) с удлиненным окрашенным гематоксилином ядром (цитоплазма видна плохо) и называются сухожильными пучками I порядка. Пучки первого порядка соединяются вместе, образуя пучки второго порядка, и по периферии ограничены прослойками рыхлой неоформленной соединительной ткани – эндотендинием (эндотенонием). Для эндотендиния характерен светлый фон и множество ядер соединительнотканных клеток (цитоплазма практически не видна), могут быть кровеносные сосуды.

Зарисовать и обозначить:

1). сухожильные волокна (пучок первого порядка); 2) сухожильный пучок второго порядка; 3) эндотендиний; 4) сухожильные клетки – тендиноциты.

Препарат 4. Эластический хрящ. Срез ушной раковины. Окраска орсеином.

Орсеин – краситель, применяемый для выявления эластических волокон. Эластический хрящ по общему плану строения сходен с гиалиновым хрящом. На большом увеличении изучить надхрящницу и хрящевую ткань. Хондроциты располагаются поодиночке или образуют изогенные группы, в которых хондроциты располагаются на этом препарате столбиками. В межклеточном веществе выявляются многочисленные эластические волокна, окрашенные орсеином в красно-коричневый цвет.

Зарисовать и обозначить:

1) надхрящница; 2) хондробласт; 3) молодой хондроцит; 4) изогенная группа хондроцитов; 5) эластические волокна.

 

 

Препарат 5. Пластинчатая костная ткань. Поперечный срез диафиза декальцинированной трубчатой кости. Окраска по методу Шморля.

Найти при малом увеличении надкостницу (периост), которая может быть окрашена в жёлтый, коричневый или зелёный цвет. Надкостница покрывает диафиз снаружи. Под надкостницей параллельно ей лежат наружные окружающие пластинки. Глубже располагаются системы концентрически наслоенных пластинок – остеоны. В центре каждого остеона проходит центральный канал. Остеон ограничен спайной линией. Костные пластинки остеонов пересекают в различных направлениях поперечные каналы, или фолькмановы каналы, соединяющие кровеносные сосуды остеонов с сосудами периоста. Между остеонами лежат вставочные (интерстициальные) пластинки–участки старых костных систем. С внутренней стороны компактного вещества лежат внутренниеокружающие пластинки. Со стороны костномозговой полости пластинки компактной кости переходят в костные перекладины губчатой кости. Эндост – тонкая оболочка, покрывающая балки губчатой кости. На большом увеличении можно видеть светлые полости, располагающиеся между костными пластинками, параллельно им, - костные лакуны,где лежат тела остеоцитов. Отростки остеоцитов проходят в костных пластинках перпендикулярно направлению пластинки (радиально), окрашены в коричневый цвет. В центре каждого остеона проходят кровеносные сосуды (эритроциты окрашены в чёрный цвет).

Зарисовать и обозначить:

1) надкостница; 2) наружные окружающие пластинки; 3) пластинки остеона;

4) центральный канал остеона; 5) вставочная пластинка; 6) внутренняя окружающая пластинка; 7) остеоцит и костный каналец с расположенным в нём отростком остеоцита.

Препарат 6. Развитие кости на месте мезенхимы (Мембранозное развитиеили Прямой остеогенез).Поперечный срез челюсти животного. Окраска гематоксилином и эозином.

При малом увеличении на препарате следует найти зону окостенения – островки (балки) грубоволокнистой костной ткани, окрашенные гомогенно эозином в розовый цвет. При большом увеличении изучить клетки костной ткани. На поверхности костных балок находятся остеобласты – клетки кубической или полигональной формы с базофильной цитоплазмой. Остеоциты – мелкие клетки со светлой цитоплазмой, расположены в толще костной балки. Остеокласты – крупные многоядерные клетки, их цитоплазма окрашена оксифильно, расположены на периферии костных балок, часто в углублениях. Островки окружены клетками мезенхимы – отростчатыми, со слабобазофильной цитоплазмой. В толще костных балок и в мезенхиме могут присутствовать кровеносные сосуды – тонкостенные трубочки, содержащие форменные элементы крови.

Зарисовать и обозначить:

1) грубоволокнистая костная ткань; 2) остеобласт; 3) остеоцит; 4) остеокласт;

5) мезенхима.

Остеоцит.Остеоцит располагается в костной полости – лакуне – внутри минерализованного (электронно-плотного) матрикса. От лакуны радиально отходят узкие костные канальцы, в которых проходят отростки остеоцита. Остеоцит имеет уплощенное, тёмное (богатое гетерохроматином) ядро, ядрышко отсутствует. Органеллы биосинтеза слабо развиты.

.