 |
|
Определение группы крови по системе АВО
1. Определение группкрови спомощьюстандартных изогемагглютинирующихсывороток.
Суть метода сводится к обнаружению в исследуемой крови групповых антигенов А и В с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Для этого используется реакция агглютинации.
Перед началом реакции подписывают тарелку (наносят фамилию и инициалы исследуемого). После чего на нее под соответствующие обозначения наносят стандартные изогемагглютинирующие сыворотки I,II,III групп в объеме 0,1 мл. Во избежание ошибок наносят две серии сывороток каждой из групп, так как одна из серий может иметь низкую активность и не дать четкой агглютинации. Всего получается 6 капель, которые образуют два ряда по три капли в следующем порядке слева направо: О(I), А(II),В(III). Кровь для исследования берут из пальца или из вены. Шесть капель исследуемой крови величиной с булавочную головку (0,01 мл, маленькая капля) последовательно переносят сухой стеклянной палочкой на пластину в 6 точек, каждую рядом с каплей стандартной сыворотки (количество испытуемой крови должно быть приблизительно в 10 раз меньше количества стандартной сыворотки, с которой она смешивается ), потом их с помощью стеклянных палочек с закругленными кроями перемешивают. После смешения тарелку периодически покачивают. Агглютинация начинается в течение 10 – 30 секунд, однако наблюдение следует обязательно вести до 5 минут ввиду возможности более поздней агглютинации. В те капли, где произошла агглютинация, добавляют по одной капле изотонического раствора хлорида натрия, после чего оценивают результат реакции.
Трактовка результата:
1.при отсутствии агглютинации во всех лунках исследуемая кровь принадлежит к О(I)группе крови.
2. при наличии агглютинации в первой и третьей лунках исследуемая кровь принадлежит ко А(II)группе крови.
3.при наличии агглютинации в первой и второй лунках исследуемая кровь принадлежит к В(III)группе крови.
4.при наличии агглютинации во всех лунках исследуемая кровь подвергается проверке на принадлежность к АВ(IV)группе крови. Для этого дополнительно в отдельной лунке проводят исследование со стандартной изогемагглютининовой сывороткой АВ(IV) группы. Если кровь принадлежит к АВ(IV) группе – агглютинации при дополнительном исследовании наблюдаться не будет.
Определение групп кровимоноклональнымиантителами
(спомощьюЦОЛИКЛОНов).
Техника проведения: цоликлоны анти – А и анти – В наносят на белый планшет по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями: анти – А и анти – В . Рядом с ними наносят по одной маленькой капле (0,01 мл)исследуемой крови. После перемешивания составных частей за реакцией агглютинации наблюдают в течение 2-3 минут.
Трактовка результатов:
1. при отсутствии агглютинации во всех двух лунках исследуемая кровь принадлежит к О(I)группе крови.
2.при наличии агглютинации в лунке “анти – А” исследуемая кровь принадлежит ко А(II) группе крови.
3. при наличии агглютинации в лунке “анти – В” исследуемая кровь принадлежит к В(III) группе крови.
4.при наличии агглютинации во всех двух лунках исследуемая кровь принадлежит к АВ(IV)группе крови.