 |
|
Визначення бензолу і нафталіну в їх суміші методом високоефективної рідинної хроматографії. Які прилади використовуються в цьому методі.
Хроматографія - це засіб розподілу речовин, заснований на різниці в їх ко-
ефіцієнтах розподілу між двома фазами, одна з котрих нерухома, а інша спрямовано рухається відносно першої. Характерними ознаками хроматографії є наявність достатньо великої поверхні розділу між фазами та динамічний засіб виконання розділу(спрямований рух однієї фази відносно іншої). Сполучення цих двох ознак робить хроматографію високоефективним методом розділу, який дозволяє відокремлювати одна від одної близькі за своїми властивостями речовини, такі як ізотопи елементні та оптично активні ізомери. Характерними відзнаками високоефективної рідинної хроматографії є: використання колонки з малим внутрішнім діаметром малим діаметром часток сорбенту (3-10 мкм), великим тиском елюенту (розчиннику) на вході у колонку, високою чутністю детекторів, які дозволяють визначити до 10-9-10-10 г речовини. Цей метод дозволяє аналізувати речовини з високою точкою кипіння ( > 400o C), а також нестійки сполуки, які не можна розділити методом газової хроматографії. В високоефективній рідинній хроматографії застосовуються усі методи хроматографічного розподілу (адсорбція, розподілювальній, іонний обмін). В залежності від полярності нерухомої і рухомої фази існують два варіанти рідино адсорбційної хроматографії: нормально-фазова, та зворотно фазова. В нормально-фазової використовується полярний сорбент (частіш за усе силікагель) і неполярний розчинник (гексан). В зворотно фазової адсорбент неполярний, а розчинник полярний (спирти, вода). В роботі використовується хроматограф рідинний мік-
роколоночний "Міліхром". Спрощена блок-схема хроматографу наведена на
мал.
1- резервуар; 2 - насос; 3 - пристрій вводу проби; 4 - колонка; 5 - спектрофотометричний детектор; 6 - регістратор; 7 - блок управління.
Насос хроматографу забезпечує подачу розчиннику (елюенту) з тиском до
5 МПа з регулюванням витрат 2-600 мкл/хвилину з помилкою 1 %. Об'єм
насосу – 2500 мкл. Блок управління забезпечує подачу потрібного об'єму елюенту і проби від 0.1 до 2000 мкл.
Спектрофотометричний детектор забезпечує визначення оптичної густини у спектральному діапазоні 190-360 нм і має у своєму складі джерело струму – дейтерієву лампу ДДС-30, монохроматор та фотометр. Диспергуючим
елементом монохроматору є дифракційна решітка з 3600 штрихів на 1 мм, зміна довжини хвилі забезпечується зворотом дифракційної решітки за допомогою крокуючого двигуна. Принцип дії фотометра засновано в по черговому проходженні монохроматичного світового потоку через робочу та кювету зрівняння з реєстрацією потоків фотомножником. Електронний блок забезпечує керування модулятором, встановлення робочої довжини хвилі та цифрову індикацію оптичної густини. Хроматограф забезпечує можливість зняття спектру з дискретністю 2 нм, зміну часу вимірювання від 0,15 до 20 с і змінення масштабу інформації від 12,8 до 0,05.
Реєстрація хроматограм здійснюється за допомогою двокоординатного приладу ЛКД 4-003, який дозволяє виконувати реєстрацію на звичайному папері. Колонка для хроматографування являє сталеву нержавіючу трубку з внутрішнім діаметром 2 мм. Використовується стандартна колонка з адсорбентом Силасорб 600 з d = 5 мкм і довжиною 62 мм.
Хроматографування аналізуємого та стандартних розчинів треба виконувати у такій послідовності:
1. Включити хроматограф і прогріти його не менш чим півгодини. Натиснути кнопку "Вкл" керування насосом.
2. Заповнити насос елюентом (гексаном).
3. Приєднати та прокачати колонки елюентом до припинення виділення з елюенту пухирців повітря.
4. Приєднати шприц, заповнений елюентом, до кювети порівняння і заповнити її.
5. Ввімкнути реєстратор і підготувати його до роботи, встановивши необхідну розгортку.
6. Роз'єднати інжектор від колонки і заповнити його пробою.
7. Приєднати інжектор до колонки, ввімкнути на реєстраторі "пуск Т" і
включити подачу елюенту, встановивши попередньо бажаний режим хроматографування.
8. Після реєстрації хроматограми вимкнути на реєстраторі "Перо", "Пуск
Т", на хроматографі вимкнути насос.
Щоб отримати нову хроматограму необхідно заповнити насос елюентом і
встановити перо на вільне місце на папері за допомогою ручки "Установка ну-
ля".
Задача.