Главная | Обратная связь

С П Е К Т Р О Ф О Т О М Е Т Р И Я

 

1. Раствор исследуемого пигмента поглощает 90% падающего света. Во сколько раз увеличится коэффициент поглощения раствора при двукратном увеличении концентрации пигмента ? Допустить, что закон Бугера-Ламберта-Бера соблюдается.

 

2. Раствор вещества А в кювете толщиной 1 см пропускает 90% света. Раствор вещества Б в той же кювете пропускает 80% света. Какова оптическая плотность смеси равных объемов этих растворов, измеренная в кювете толщиной 1 см ?

 

3. Максимум поглощения гема гемоглобина наблюдается при l=418 нм. Рассчитать поперечное сечение гема гемоглобина, если оптическая плотность раствора гемоглобина с концентрацией 0,5 мг/мл при l=418 нм и l=1 cм равна 0,88. М.в. гемоглобина 68000. Одна молекула гемоглобина содержит 4 гема.

 

4. Оптическая плотность раствора сывороточного альбумина при l=255 нм составляет 1,5. Молекула человеческого сывороточного альбумина содержит 2 остатка триптофана и 18 остатков тирозина. e₂₅₅ триптофана = 2800 М^-1см^-1, e₂₅₅ тирозина = 300 М^-1см^-1. Рассчитать молярные концентрации триптофана и тирозина в растворе этого белка и молярную концентрацию самого белка.

 

5. Рассчитать концентрацию белка, если одна его молекула содержит 2 остатка триптофана (e₂₈₀=5000 М^-1см^-1) и 4 остатка тирозина (e₂₈₀=1500 М^-1см^-1), оптическая плотность раствора белка D₂₈₀=0,5 при толщине кювет 1 см.

 

6. Оптическая плотность раствора белка концентрации 2,7^.10^-5 М, содержащего 2 остатка триптофана и несколько остатков тирозина в молекуле, равна 1,0 при l=280 нм. Сколько остатков тирозина в молекуле белка, если e_тир=1500 М^-1см^-1, e_три=5000 М^-1см^-1 (l=280 нм), толщина кюветы 1 см ?

 

7. Раствор НАД имел оптическую плотность 0,05 при l=340 нм (толщина кюветы 1 см). После частичного восстановления НАД до НАДН плотность раствора возросла до 0,2. Какова стала концентрация НАД и НАДН в растворе, если их молярные коэффициенты экстинкции равны 10³ М^-1см^-1 и 6^.10³ М^-1см^-1 соответственно?

 

8. Определить молярную концентрацию белка, содержащего 2 остатка триптофана в молекуле, если в кювете толщиной 1 см оптическая плотность раствора белка равна 1, вклад светорассеяния в эту величину составляет 20%, коэффициент молярной экстинкции триптофана равен 5000 М^-1см^-1 (l=280 нм).

 

 

9. В растворе пигмента 30% молекул образуют димеры. Молярный коэффициент экстинкции димера в 1,6 раза больше, чем у мономера. Будет ли наблюдаться отклонение от закона Бугера-Ламберта-Бера ?

 

10. Раствор соединения А имеет D₂₆₀=0,45 и D₄₅₀= 0,03. Раствор второго соединения Б имеет D₂₆₀=0,004 и D₄₅₀=0,81. 2 мл раствора А смешали с 1 мл раствора Б. Результирующая оптическая плотность смеси D₂₆₀= 0,3 и D₄₅₀=0,46. Имеется ли взаимодействие между А и Б ? Объяснить. Какое допущение делается, чтобы подтвердить это заключение?

 

11. Молярный коэффициент поглощения данного соединения при l=482 нм равен 348 М^-1см^-1. Раствор этого соединения имеет D₄₈₂= 1,6. При разбавлении 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5 и 1:6 величина D₄₈₂ составляет 1,52; 1,41; 1,05; 0,84; 0,70 и 0,61 соответственно. Какова молярность исходного раствора ?

 

12. 0,1 мл раствора аденозина в фосфатном буфере разбавили до объема 25 мл. Оптическая плотность полученного раствора при 259 нм оказалась равной 0,77. Молярная экстинкция аденозина при 259 нм составляет 1,54^.10⁴ М^-1см^-1 . Какова концентрация исходного раствора аденозина ?