 |
|
Химическим методом.
Принцип метода:
Кальций образует с глиоксаль-бис-2-оксианилом в щелочной среде комплекс красного цвета, который определяют фотометрически.
Материал для исследования: сыворотка крови.
Реактивы:
1. Раствор едкого натра;
2. Метанол;
3. Глиоксаль-бис-2-оксианил;
4. Стандартный раствор кальция.
Приготовление реактива:
Глиоксаль-бис-2-оксианил растворяют в метаноле.
Ход определения:
| Отмерить (мл) | Проба | Эталон | Контроль раствор |
| Дистиллированная вода Сыворотка крови Калибровочный раствор Раствор едкого натра | 1,00 0,02 - 0,50 | 1,00 - 0,02 0,50 | 1,02 - - 0,50 |
| Перемешивают и спустя 5-10 минут добавляют | |||
| Раствор глиоксаль-бис-2-оксианила | 2,00 | 2,00 | 2,00 |
| Перемешивают и между 5-ой и 15-ой минутой после добавления раствора глиоксаль-бис-2-оксианила измеряют оптическую плотность пробы (Dо) и эталона (Dст) против контрольного раствора. Длина волны 520-550 нм, кювета 1 см. |
Расчет результатов:
Dо
Кальций (ммоль/л) = ------ * Сст
Dст
Сст= 2,5 ммоль/л
Предупреждение:
Лабораторная посуда, применяемая при определении кальция, должна быть совершенно чистой и служить исключительно для данной цели. После обычного мытья посуду следует поместить на ночь в 2% раствор комплексона 3 в аммиачной воде 1+1, потом тщательно промыть бидистиллированной водой и высушить.
Меры предосторожности по ходу работы:
В реактиве 1 содержится хлористоводородная кислота, в реактиве 3 – натрия гидроокись, оба – едкие вещества. В реактиве 4 содержится метиловый спирт – особо опасный яд и горючее вещество.
Увеличение содержания кальцияпроисходит при:
· Физиологической гиперкальциемии, наблюдается у новорожденных, а также у недоношенных детей;
· Избыточном введении в организм ребенка витамина Д
(передозировка);
· Злокачественных опухолях с метастазированием в кости и
без метастазирования;
· Гиперфункции паращитовидных и щитовидной желез;
· Акромегалии, гигантизме и т.д.
Уменьшение содержания кальция наблюдается при:
· Спазмофилии у детей;
· Рахите;
· Гипопаратиреоидизме (обычно после случайного удаления во
время операции на щитовидной железе);
· Хронической почечной недостаточности.
ЖЕЛЕЗО.
Железо в организме входит в состав порфириновых соединений, главным образом, гемоглобина и миоглобина, в небольших количествах оно включается в состав цитохромов, некоторых ферментов. Железо в сыворотке связывается белком трансферрином. Концентрация железа в сыворотке зависит от резорбции в желудочно-кишечном тракте, накопления в кишечнике, селезенке и костном мозге, от синтеза и распада гемоглобина и его потери организмом. Средние показатели железа ниже у женщин, чем у мужчин, но у тех и у других с возрастом показатель железа падает. Концентрация железа имеет суточный ритм, а у женщин - связь с менструальным циклом. При беременности содержание железа в организме уменьшается, особенно во второй половине беременности.
Нормальное содержание железа:
у женщин -14-21,5 мкмоль\л,
у мужчин - 14-26,0 мкмоль\л.