 |
|
Пример конкретного выполнения.
Пример 1. Эффекты пептида NH2-D-ala-L-Glu-L-Trp-COOH при внутрибрюшинном введении.
Крысам Вистар (10 животных) под хлоралгидратным наркозом (300 мг/кг внутрибрюшинно) на холке моделировали полнослойные раны стандартного размера (1 см2) (Амирасланов Ю.А., Матасов В.М., Хотинян В.Ф. Лечение ран в управляемой абактериальной среде. – М., 1981. – 157 с.). Пептид с общей формулойNH2-D-ala-L-Glu-L-Trp-COOH растворяли в стерильном изотоничном растворе хлорида натрия и вводили животным в обьеме 0,1 мл внутрибрюшинно в разовой дозе 1,2 мкг/кг массы десятикратно (один раз в сутки) с интервалом в 24 часа между инъекциями. Последнее введение препаратов осуществляли за 12 часов до вывода животных из эксперимента. На следующий день после последнего введения крыс забивали обескровливанием под хлоралгидратным наркозом. Объектами исследования служили кровь и ткани кожи.
Выявленные репаративные, иммунотропные и антиоксидантные эффекты представлены в таблицах 1 и 2.
Таблица 1
Влияние пептида NH2-D-ala-L-Glu-L-Trp-COOH на количество фибробластов и лимфоцитов (M±m, n=10) в сосочковом слое кожи при внутрибрюшинном введении в условиях кожных ран
| № п/п | Условия опыта | Фибробласты | Лимфоциты |
| 1. | Контроль (NaCl) | 29,3±4,2 | 20,7±1,5 |
| 2. | Тимоген 1мкг/кг | 29,6±1,7 | 25,4±1,7*1 |
| 3. | NH2-glu-trp-D-ala-СOOH 1,2 мкг/кг | 34,5±2,4*1.2 | 23,8±1,9*1 |
Примечание: * – показывает достоверные отличия, р<0,05, а рядом стоящая цифра – номера групп сравнения; .n – количество животных в группе.
Пептид NH2-L-Glu-L-Trp-D-Ala-COOH повышает число фибробластов с коже, что свидетельствует о его репаративной активности. При этом он обладает более выраженным действием по сравнению с тимогеном (таблица 1).
Таблица 2
Иммунотропные и антиоксидантные эффекты (M±m, n=10) пептида NH2-D-ala-L-Glu-L-Trp-COOH в условиях кожных ран при внутрибрюшинном введении
| № п/п | Условия опыта | Антиоксидантная функция | Иммунная функция | ||
| Супероксиддис-мутаза ус ед. | МДА Мкмоль/л | ФЧ | НСТ, ОП | ||
| 1. | Контроль (NaCl) | 2,32±0,22 | 2,26±0,41 | 4,53±0,63 | 0,22±0,015 |
| 2. | Тимоген 1мкг/кг | 2,71±0,20*1 | 2,04±0,11 | 6,54±0,89*1 | 0,242±0,023*1 |
| 3. | NH2-glu-trp-D-ala-COOH 1,2 мкг/кг | 3,01±0,16**1,2 | 1,94±0,15 | 5,7±0,94*1 | 0,314±0,009**1,2 |
Примечание: * – показывает достоверные отличия, р<0,05, а рядом стоящая цифра – номера групп сравнения; .n – количество животных в группе.
Пептид NH2-D-ala-L-Glu-L-Trp-COOH повышает активность СОД и стимиулирует функцию нейтрофилов (ФЧ, НСТ) крови, что свидетельствует о его иммуностимулирующей и антиоксидантной активности. При этом он обладает более выраженными эффектами по сравнению с тимогеном (таблица 2).
Пример 2. Эффекты пептида NH2-D-ala-L-Glu-L-Trp-COOH при внутрикожном (местном) введении.
Крысам Вистар (10 животных) под хлоралгидратным наркозом (300 мг/кг внутрибрюшинно) на холке моделировали полнослойные раны стандартного размера (1 см2) (Амирасланов Ю.А., Матасов В.М., Хотинян В.Ф. Лечение ран в управляемой абактериальной среде. – М., 1981. – 157 с.). Пептид с общей формулойNH2-D-ala-L-Glu-L-Trp-COOH растворяли в стерильном изотоничном растворе хлорида натрия и вводили животным в обьеме 0,1 мл внутрикожно в разовой дозе 1,2 мкг/кг массы десятикратно (один раз в сутки) с интервалом в 24 часа между инъекциями. Последнее введение препаратов осуществляли за 12 часов до вывода животных из эксперимента. На следующий день после последнего введения крыс забивали обескровливанием под хлоралгидратным наркозом. Объектами исследования служили кровь и ткани кожи.
Выявленные репаративные, иммунотропные и антиоксидантные эффекты представлены в таблицах 3 и 4.
Таблица 3
Влияние пептида NH2-D-ala-L-Glu-L-Trp-COOH на количество фибробластов и лимфоцитов (M±m, n=10) в сосочковом слое кожи при внутрикожном введении в условиях кожных ран
| № п/п | Условия опыта | Фибробласты | Лимфоциты |
| 1. | Контроль (NaCl) | 36,5±4,4 | 8,3±2,1 |
| 2. | Тимоген 1мкг/кг | 45,9±1,9*1 | 8,7±0,9 |
| 3. | NH2-glu-trp-D-ala-СOOH 1,2 мкг/кг | 52,3±1,6*1,2 | 6,5±0,8*1,2 |
Примечание: * – показывает достоверные отличия, р<0,05, а рядом стоящая цифра – номера групп сравнения; .n – количество животных в группе.
При внутрикожном введении пептид NH2-L-Glu-L-Trp-D-Ala-COOH повышает число фибробластов и снижает число лимфоцитов в коже, что свидетельствует о его стимулирующем действии на процессы репаративной регенерации, а следовательно и заживления кожных ран. При этом он обладает более выраженным действием по сравнению с тимогеном (таблица 3).
Таблица 4
Иммунотропные и антиоксидантные эффекты (M±m, n=10) пептида NH2-D-ala-L-Glu-L-Trp-COOH в условиях кожных ран при внутрикожном введении
| № п/п | Условия опыта | Антиоксидантная функция | Иммунная функция | ||
| Супероксиддис-мутаза ус ед. | МДА Мкмоль/л | ФЧ | НСТ, ОП | ||
| 1. | Контроль (NaCl) | 2,32±0,22 | 2,26±0,41 | 4,53±0,63 | 0,22±0,015 |
| 2. | Тимоген 1мкг/кг | 3,0±0,20**1 | 1,68±0,27**1 | 6,89±0,87*1 | 0,393±0,017**1 |
| 3. | NH2-glu-trp-D-ala-COOH 1,2 мкг/кг | 3,12±0,16*1 | 1,0±0,15**1,2 | 6,27±0,84**1,2 | 0,347±0,012**1,2 |
Примечание: * – показывает достоверные отличия, р<0,05, а рядом стоящая цифра – номера групп сравнения; .n – количество животных в группе.
При внутрикожном введении пептид NH2-L-Glu-L-Trp-D-Ala-COOH повышает активность СОД, что свидетельствует о проявлении им антиоксидантной активности. При этом он стимулирует функцию нейтрофилов (ФЧ, НСТ) крови, что свидетельствует о его иммуностимулирующей активности (таблица 4).
Таким образом, пептид, имеющий формулу NH2-L-Glu-L-Trp-D-Ala-COOH стимулирует процессы репаративной регенерации кожи, а следовательно заживления ран, и при этом он обладает иммуностимулирующим и антиоксидантным эффектами как при внутрибрюшинном, так и при внутрикожном (местном) введении.